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肝星狀細(xì)胞常用的制備方法分享

更新時(shí)間:2023-11-14點(diǎn)擊次數(shù):699
  肝星狀細(xì)胞是一類非專業(yè)免疫細(xì)胞,主要分布在肝臟的間質(zhì)空間中。它們富含維生素A,并以其特殊的星形外觀而得名。在正常情況下,它處于靜止?fàn)顟B(tài),并參與調(diào)節(jié)肝臟的生理功能,如合成和儲(chǔ)存膠原蛋白、調(diào)控血管張力等。然而,在肝臟損傷或疾病發(fā)展過程中,肝星狀細(xì)胞會(huì)被激活并轉(zhuǎn)化為纖維母細(xì)胞樣表型,參與了纖維化反應(yīng)和組織修復(fù)過程。
 

 

  為了深入了解其生物學(xué)特性以及在肝臟疾病中的作用機(jī)制,科學(xué)家們開展了大量的實(shí)驗(yàn)研究,并提出了多種制備方法。其中,常用的方法是從小鼠或人類肝臟組織中分離和培養(yǎng)肝星狀細(xì)胞。
 
  首先,需要獲取新鮮的肝臟組織樣本。對(duì)于小鼠實(shí)驗(yàn),可以通過解剖小鼠并迅速取出肝臟來獲取樣本。對(duì)于人類實(shí)驗(yàn),通常從手術(shù)切除的肝臟組織中獲取樣本。然后,將組織切成小塊,并使用消化酶(如胰蛋白酶)進(jìn)行消化。消化后的細(xì)胞懸液經(jīng)過離心分離,得到一個(gè)包含多種細(xì)胞類型的混合物。
 
  接下來,利用密度梯度離心法將混合物進(jìn)行分層。這一步可以根據(jù)不同細(xì)胞類型的密度差異將肝星狀細(xì)胞與其他細(xì)胞分離開來。通常采用50% Percoll溶液制備密度梯度,并在高速離心后收集位于特定密度層上的細(xì)胞。
 
  分離得到的細(xì)胞可以通過培養(yǎng)在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)增和傳代。培養(yǎng)基通常包含適當(dāng)濃度的血清、營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子,以提供細(xì)胞所需的營養(yǎng)和生長條件。在培養(yǎng)過程中,它會(huì)逐漸失去其星形外觀,并轉(zhuǎn)化為纖維母細(xì)胞樣表型。
 
  肝星狀細(xì)胞的制備方法不僅在科學(xué)研究中有重要意義,還在臨床應(yīng)用中具有潛力。由于它參與了肝臟纖維化的發(fā)生和發(fā)展,研究人員可以利用制備得到的肝星狀細(xì)胞來探索抗纖維化藥物的篩選和評(píng)估。此外,還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的靶向載體,在治療肝臟相關(guān)疾病時(shí)發(fā)揮作用。
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